多选题
发布日期:2020-08-20
质粒、噬菌体可作为载体
限制性内切酶是主要工具酶之一
重组DNA由载体DNA和目标DNA组成
重组DNA分子经转化或传染可进入宿主细胞
进入细胞内的重组DNA均可表达目标蛋白
基因工程的关键技术是脱氧核糖核酸的连接和重组,在此过程中一些酶起着至关重要的作用,这些酶统称为基因工程工具酶。工具酶种类繁多、功能各异,主要包括限制酶、聚合酶、连接酶、修饰酶和核酸酶五大类。其中,以限制性核酸内切酶和DNA连接酶在分子克隆中的作用最为突出。这些酶具有特异性的序列识别能力以及高效的生物催化活性,在一定的条件下可以对核酸分子进行切割、连接、扩增以及修饰等,同时工具酶的反应条件温和且具有出色的生物相容性。基于这些优势,工具酶被广泛地应用于核酸、蛋白质和小分子等生物活性分子的分析检测。
噬菌体(phage)是侵袭细菌的病毒,也是赋予宿主菌生物学性状的遗传物质。噬菌体必须在活菌内寄生,有严格的宿主特异性,其取决于噬菌体吸附器官和受体菌表面受体的分子结构和互补性。噬菌体是病毒中最为普遍和分布最广的群体。通常在一些充满细菌群落的地方,如:泥土、动物的肠道里,都可以找到噬菌体。
质粒(plasmid) 广泛存在于生物界,从细菌、放线菌、丝状真菌、大型真菌、酵母到植物,甚至人类机体中都含有。从分子组成看,有DNA 质粒,也有RNA 质粒; 从分子构型看,有线型质粒、也有环状质粒: 其表型也多种多样。细菌质粒是基因工程中最常用的载体。质粒是细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体(或拟核)以外的DNA分子,存在于细胞质中(但酵母除外,酵母的2 μm质粒存在于细胞核中),具有自主复制能力,使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息,是闭合环状的双链DNA分子。质粒不是细菌生长繁殖所必需的物质,可自行丢失或人工处理而消除,如高温、紫外线等。质粒携带的遗传信息能赋予宿主菌某些生物学性状,有利于细菌在特定的环境条件下生存。与细菌基因组相同,质粒也属于环形双链DNA(共价闭环DNA,covalently closed circular DNA, cccDNA)。
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