Ⅱ类限制性内切核酸酶分子量较小.一般在 20~40kDa,通常由()亚基所组成。它们的作用底物为双链 DNA,极少数Ⅱ类酶也可作用于单链 DNA,或 DNA/RNA 杂合链。这类酶的专一性强,它不仅对酶切点邻近的两个碱基有严格要求,而且对更远的碱基也有要求,因此,Ⅱ类酶既具有()专一性,也具有()的专一性,一般在识别序列内切割。切割的方式有(),产生()末端的DNA片段或()的DNA片段。作用时需要()作辅助因子,但不需要()和()。
离心除去断裂的染色体DNA以及细胞的碎片,使用酚处理等方法除去包括核酸酶的蛋白质,再使用乙醇沉积等方法将DNA从上清液中沉积下来( )。
Bal31核酸酶(Bal31nuclease)是Ca2+依赖性的,在反应混合物中加入 EDTA便可抑制它的活性。
限制性内切核酸酶 PstI切割质粒 pBR322后,再用外切核酸酶 ExoⅢ进行系列缺失,可得到一系列大小不同的缺失突变体。
DNA损伤切除修复需要四种酶,①DNA聚合酶、②内切核酸酶、③5′→3′外切核酸酶、④连接酶。修复历程中,它们的顺序是()。
以切割核酸链的方式区分,核酸酶可以分成()和()两大类,它们各自切割核酸链产生()和()产物。按对糖的特异性区分,核酸酶可以分成()和()两大类。
用限制性内切核酸酶 HaeⅢ分别切割载体 DNA 和供体 DNA 后,可用 E.coli DNA连接酶进行连接。
双酶消化法(doubledigests)绘制限制性内切核酸酶酶谱的原理。
简述White和Anfinsen进行的牛胰核糖核酸酶(Rnase)变性和复性的经典实验。这个实验说明了什么问题?
nuclease-supersensitive site (核酸酶超敏感位点)