问答题
λYES（酵母—大肠杆菌穿梭载体）是构建 cDNA 文库的高效载体，这种载体是λ噬菌体基因组与一个在大肠杆菌和酵母中都能复制的质粒巧妙结合而成，它兼有病毒和质粒载体的优点。cDNA 被插入载体的质粒部分，然后它能在体外被包装入病毒颗粒中，包装起来的载体感染大肠杆菌的效率比质粒本身要高得多。一旦进入了大肠杆菌，λYES中的质粒序列能够被诱导重组出λ基因组，并进行独立复制，这就可以从质粒中分离出来，以便进行进一步的遗传操作。 为了最大限度地提高克隆效率，载体用只有一个切点的限制性内切核酸酶 XhoI（5’-C十 TCGAG）进行切割，然后在 dTTP 存在的情况下，同 DNA 聚合酶一起进行温育。将一种具有平末端的双链 cDNA 同一段含由两段寡聚核苷酸组成的双链寡聚核苷酸接头连接起来，这两段寡聚核苷酸的序列是：5’—CGAGATTTACC 和5’—GGTAAATC，它们的 5’端都是磷酸。然后将载体和 cDNA混合并连接在一起。采用这种方法用 2μg的7载体和 0.1μg 的 cDNA，构建了一个有 4×10 个克隆的 cDNA 文库。假定载体长为 43kb，cDNA 的平均长度是 lkb，请估计在连接混合物中，载体分子同cDNA 的比例是多少？
发布日期：2020-04-11
试题解析
大肠杆菌
大肠杆菌（Escherichia coli），又叫大肠埃希氏菌，Escherich在1885年发现的。大肠杆菌是条件致病菌，在一定条件下可以引起人和多种动物发生胃肠道感染或尿道等多种局部组织器官感染。
- 拉丁学名
- Escherichiacoli
- 界
- 细菌界
- 纲
- γ-变形菌纲
- 科
- 肠杆菌科
- 种
- 大肠杆菌
- 中文学名
- 大肠埃希氏菌
- 别名
- 大肠杆菌
- 门
- 变形菌门
- 目
- 肠杆菌
- 属
- 埃希氏菌属
- 分布区域
- 人、动物
构建
构建，汉语词汇。注音：gòu jiàn，建立（多用于抽象事物）：～新的学科体系。
- 中文名
- 构建
- 英文
- structure
- 读音
- gòu jiàn
- 用法
- 多用于抽象事物
酵母
酵母(saccharomyces) 是基因克隆实验中常用的真核生物受体细胞，培养酵母菌和培养大肠杆菌一样方便。酵母克隆载体的种类也很多。酵母菌也有质粒存在，这种2μm 长的质粒称为2μm 质粒，约6 300bp。这种质粒至少有一段时间存在于细胞核内染色体以外，利用2μm 质粒和大肠杆菌中的质粒可以构建成能穿梭于细菌与酵母菌细胞之间的穿梭质粒。酵母克隆载体都是在这个基础上构建的。酵母是一种单细胞真菌，并非系统演化分类的单元。一种肉眼看不见的微小单细胞微生物，能将糖发酵成酒精和二氧化碳，分布于整个自然界，是一种典型的异养兼性厌氧微生物，在有氧和无氧条件下都能够存活，是一种天然发酵剂。一般泛指能发酵糖类的各种单细胞真菌，可用于酿造生产，也可为致病菌——遗传工程和细胞周期研究的模式生物。酵母菌是人类文明史中被应用得最早的微生物。已知有1000多种酵母，根据酵母菌产生孢子（子囊孢子和担孢子）的能力，
- 中文名
- 酵母
- 拉丁学名
- Yeast
- 门
- 子囊菌门
- 纲
- 半子囊菌纲
- 科
- 酵母科
- 分布区域
- 偏酸性的潮湿的含糖环境
- 别名
- 酿母
- 界
- 真菌界
- 亚门
- 子囊菌亚门
- 目
- 内孢霉目
- 属
- 酵母属
- 大小
- 一般为1～5或5～20
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