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问答题

简述易错PCR技术进行体外基因突变的主要过程。

发布日期:2020-12-11

简述易错PCR技术进行体外基因突变的主要过程。

试题解析

聚合酶链式反应

聚合酶链式反应(PCR)是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。因此,无论是化石中的古生物、历史人物的残骸,还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液,只要能分离出一丁点的DNA,就能用PCR加以放大,进行比对。这也是“微量证据”的威力之所在。由1983年美国Mullis首先提出设想,1985年由其发明了聚合酶链反应,即简易DNA扩增法,意味着PCR技术的真正诞生。到如今2013年,PCR已发展到第三代技术。1976年,中国科学家钱嘉韵,发现了稳定的Taq DNA聚合酶,为PCR技术发展也做出了基础性贡献。PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷

中文名
聚合酶链式反应
简称
PCR
目前状态
第三代技术
外文名
Polymerase Chain Reaction
属性
链式反应
提出人
穆利斯

体外

体外是指用器官灌注、组织培养、组织匀浆、细胞培养、亚细胞组分、生物材料的粗提取物等在生物体外进行实验的模式。

简述

简述是一个汉语词汇,意思是用简要的语言陈述,描述或总结。

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甲公司以境内、境外全部生产经营活动有关的研究开发费用总额、销售收入总额、高新技术产品收入等指标申请并经认定为高新技术企业,属于增值税一般纳税人。2014年度相关生产经营资料如下:(1)甲公司坐落在某市区,全年实际占用土地面积共计500000平方米,其中:公司办的幼儿园占地3000平方米,厂区内道路及绿化占地4000平方米,经营门市部占地5000平方米,生产经营场所占地488000平方米。(2)甲公司当年固定资产原值共计12000万元,其中:房产原值8000万元,机器设备及其他固定资产原值4000万元。4月1日将房产原值800万元的办公楼出租给某企业作经营用房,出租期限3年,共计租金720万元,每个季度租金60万元,在租用期的当季收取当季的租金。(3)公司拥有乘用车20辆,整备质量为4吨的货车50辆。乘用车年基准税额为500元,货车整备质量每吨年单位税额为80元,公司计算缴纳车船税2.6万元。(4)当年实现不含税销售额共计8000万元,取得送货的运费收入58.5万元(和销售收入统一开票,未分别核算);购进原材料,取得防伪税控增值税专用发票上注明购货金额5176.5万元,进项税额880.005万元;另支付运输部门运输费用,取得货运增值发票上注明运费20万元,增值税2.2万元;支付装卸费用,取得增值税专用发票上注明装卸费8万元,增值税0.48万元。国庆节前,将自产产品作为福利发放给本公司每位员工,每人一套,市场含税零售价每套117元,成本正常结转。全年扣除的产品销售成本3000万元。2014年底,初次购入税控系统专用设备一台,价税合计4万元,取得增值税专用发票。(5)“投资收益”账户记载:购买国债到期兑付取得利息收入48万元,国家重点建设债券到期兑付取得利息收入14万元。境外分回的投资收益900万元,境外当地的所得税税率为10%。(6)发生财务费用220万元;其中包含与某商业银行借款1200万元(借期一年),支付的银行贷款利息60万元;向乙企业借款2000万元(借期一年),支付的年利息140万元,(乙为甲的关联企业,权益性投资800万,甲无法提供资料证明其借款活动符合独立交易原则)以及因逾期归还贷款支付的银行罚息20万元。(7)发生管理费用400万元,其中包括业务招待费60万元、给职工统一制作要求在工作中穿着的工作服费用50万元和新产品开发费用120万元,不包括房产税、城镇土地使用税和车船税。(8)发生不含税广告费740万元,取得增值税专用发票,注明税款44.4万元,业务宣传费用60万元,代销手续费5万元。另外,以前年度累计结转未扣除的广告费扣除额65万元。(9)公司本年度在册员工500人,全年计入成本、费用中的实发工资总额800万元(其中包括支付本企业残疾职工工资60万元),拨缴职工工会经费18.40万元,实际列支职工福利费122.80万元和职工教育经费25.50万元。能提供工会经费拨缴款专用收据。(10)营业外支出实际发生额60万元,其中包括非广告性的赞助25万元和直接向某少年宫的捐款10万元。(11)欠乙公司货款35万元。由于甲公司资金周转出现暂时的困难,短期内不能支付已于2014年3月1日到期的货款。2014年5月1日,经双方协商,乙公司同意甲公司以其生产的产品偿还债务并豁免剩余债务。该批产品的公允价值为20万元(不含增值税),实际生产成本为12万元,企业做了如下的会计处理:借:应付账款12贷:库存商品(12)甲企业于3月初购置《节能节水专用设备企业所得税优惠目录》所列的节能节水专用设备一台,取得的防伪税控增值税专用发票上注明价款300万元.增值税款51万元。当月投入使用,进项税额已按规定申报抵扣,并已按规定计提折旧费用。(13)2011年度甲企业发生了实际损失500万元,但因某种原因未能在当年所得税前扣除,2014年经税务机关批准允许税前扣除。甲企业2011年~2013年应纳税所得额分别为100万元、150万元和300万元。其他相关资料:城镇土地使用税每平方米单位税额2元;房产税计算余值时的扣除比例20%;相关票据在规定期限内均通过主管税务机关认证;假定2014年度账务尚未最终结账。要求:根据以上资料,按照下列序号计算回答问题,每问需计算合计数,计算结果保留四位小数。(1)计算甲公司全年应缴纳的城镇土地使用税、房产税。(2)计算甲公司全年应缴纳的增值税。(3)计算甲公司全年应缴纳的营业税、城市维护建设税和教育费附加。(4)分析甲公司用自产产品偿债的处理是否正确,如果不正确,如何进行会计调整。(5)计算甲公司2014年的会计利润。(6)计算甲公司财务费用应调整的应纳税所得额。(7)计算甲公司管理费用应调整的应纳税所得额(包括对计划开发费用的加计扣除)。(8)计算甲公司销售费用应调整的应纳税所得额。(9)计算甲公司工资薪金及附加“三费”应调整的应纳税所得额。(10)计算甲公司营业外支出应调整的应纳税所得额。(11)计算甲公司2014年度应纳的企业所得税。(12)计算甲公司2014年度应补(退)的企业所得税。

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