名词解释题
直接筛选法
发布日期：2020-04-11
试题解析
重组克隆筛选方法
重组克隆筛选方法是从经过转化、转染或转导处理所得的细菌群体中筛选出含有目的基因的重组体的方法。DNA体外重组的目的是要得到所需的重组克隆，因此重组克隆的筛选是至关重要的一步。筛选法可分为两大类。一是利用遗传学方法，借助选择表型的直接筛选法，其中包括插入失活法，即通过外源DNA插入到质粒载体的抗药性基因中，使其失活来筛选重组体;噬菌斑形成筛选法，λ噬菌体载体的DNA片段较小，不能包装成活的噬菌体颗粒而形成清晰的噬菌斑，重组体DNA由于长度加大而具有了形成噬菌斑的能力;遗传互补法，通过外源基因在重组体中表达补偿其营养缺陷的方法来筛选重组体。
- 中文名
- 重组克隆筛选方法
- 定义
- 是从经过转化、转染或转导处理所得的细菌群体中筛选出含有目的基因的重组体的方法
直接筛选法
直接筛选法即用基因组DNA直接从cDNA文库中筛选位于该基因组片段内的cDNA，如从覆盖有候选区域的YAC、PAC、BAC克隆中分离外源片段作为探针从文库中筛选候选基因;而cDNA选择法恰恰与直接筛选法相反，它把基因组DNA固定在膜上，用总cDNA与之杂交，通过PCR从中回收可与基因组片段结合的cDNA片段。
直接筛选
直接筛选即用基因组DNA直接从cDNA文库中筛选位于该基因组片段内的cDNA，如从覆盖有候选区域的YAC、PAC、BAC克隆中分离外源片段作为探针从文库中筛选候选基因;而cDNA选择法恰恰与直接筛选法相反，它把基因组DNA固定在膜上，用总cDNA与之杂交，通过PCR从中回收可与基因组片段结合的cDNA片段。
标签： 筛选
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